El amoniaco puede ser determinado espectrofotométricamente por reacción con fenol en presencia de hipoclorito (OCI-). Para realizar la determinación de nitrógeno presente en una proteína se aplicó el método anteriormente mencionado, para lo cual se pesó una muestra de 4.37 mg de proteína la que se dirigió químicamente para convertir
en amoniaco todo el nitrógeno presente. Después de este tratamiento el volumen de la muestra es de 100.0 ml. Luego
10.0 ml. de esta solución se colocan en un matraz de aforo de 50.0 ml y se tratan con 5.0 ml de una solución de fenol
más 2.0 ml de una solución de hipoclorito de sodio. La muestra se diluye a 50 ml, y la absorbancia se mide a 625 nm.
en una celda de 1 cm de espesor después de 30 min. La absorbancia leída es de 0.582 U. A. Para el análisis cuantitativo
se preparó una curva de calibración a partir de una solución patrón de 1.00 x 10-2 g de NH4Cl disueltos en 1 litro de
agua. De esta solución patrón se tomaron volúmenes de 5.0 – 10.0 – 15.0 y 20.0 ml y se agregaron a matraces de 50
ml, se trataron y analizaron de la misma manera que la muestra problema. El blanco se preparó utilizando agua
destilada en lugar del analito.
Las absorbencias leídas para la curva fueron 0.154- 0.308- 0.465 y 0.620 U. A.
respectivamente.
a) Determinar el coeficiente de absortividad molar.
b) Determinar el porcentaje en peso de nitrógeno en la proteína.
Datos: M. M. NH4Cl = 53,491 g mol-1 ; M. A. N = 14,00 g mol-1